真核细胞的细胞骨架是与维持细胞形态结构和细胞运动有关的纤维网络，由微丝、微管和中间纤维组成。肌动蛋白单体（G-Actin）一个接一个连成一串肌动蛋白链，而微丝是由两股方向相同的肌动蛋白链以螺旋的形式组成的呈圆筒状的纤维。微丝能被组装和去组装。当单体上结合的是ATP时，就会有较高的相互亲和力，单体趋向于聚合成多聚体，就是组装。而当ATP水解成ADP后，单体亲和力就会下降，多聚体趋向解聚，即是去组装。

 

 

      肌动蛋白是如何聚合与解聚的？如何研究肌动蛋白的这一功能？是否有这样的分析方法呢？

 

 

      作为专业的生命科学解决方案供应商，半岛体彩官方网站 科技为您推荐全球畅销的肌动蛋白聚合生化分析试剂盒：

 

      原理：

       此肌动蛋白聚合分析生化试剂盒基于在聚合过程中pyrene（芘）结合Actin时荧光增强的原理。随着时间的推移，在聚合过程中，当芘G-actin（单体）形成芘F-actin（纤维形肌动蛋白）时能够检测到荧光增强。此外，通过使用预先形成的芘F-actin，还可以进行解聚。肌动蛋白聚合分析生化试剂盒是一种非常快速和经济的研究肌动蛋白聚合/解聚的方案。

 

      应用：

      1.通过添加组织提取物，肌动蛋白结合蛋白或化合物来分析其对Actin聚合或解聚的影响。

      2.通过添加F-actin成核蛋白，化合物或提取物来分析其对Actin聚合的影响。

      3.通过添加F-肌动蛋白切断蛋白，化合物或组织提取物来分析其对F-actin稳态水平的影响。

      4.确定在各种实验条件下肌动蛋白聚合的临界浓度。

 

 

      仪器设备：

      荧光分光光度计（比色皿或96孔板），在365nm激发波长下具有4-10nm带宽，在407nm发射波长下具有4-10nm带宽。

 

 

      G-actin聚合形成F-actin的过程：

 

 

 

 

      actin聚合的三个阶段：

 

 

 

      G-actin聚合过程精彩视频：

 

 

 

      应用实例：

 

      使用此肌动蛋白聚合分析生化试剂盒研究Arp2/3和WASP的VCA结构域对actin聚合速率的影响。如下图：

 

 

      已发表高分文章：

      1. Nature Communications. 2015.

      2. Nature Methods. 2014.

      3. Scientific Reports. 2012.

      4.Biochemical and Biophysical Research Communications. 2012.

 

 

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